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龟仙茶高脂血症大鼠模型降血脂作用初步研究

2017/4/10 19:49:09      点击:
(1 暨南大学药学院 中药及天然药物研究所 广州 510632
2 暨南大学理工学院 食品科学与工程系 广州 510632
3 深圳凯联健康科技有限公司 深圳 518000)


  摘要:采用高脂饲料饲喂法建立高脂血症大鼠模型,通过龟仙茶(GXC)低、中、高剂量组、空白对照组及模型组分别灌胃,实验21 d后,检测大鼠血液丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TCHO)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、微量丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量,来观察GXC对实验性高脂血症大鼠血脂水平的调节作用。结果表明各个浓度的GXC均能较好的降低模型大鼠血液TCHO、TC、LDL和SOD含量,提高HDL、AST、MDA和GSH-PX的含量,其中高剂量组的作用显著优于低剂量组。研究结论:GXC能较好的调节机体的血脂水平并有效预防高脂血症。


  关键词:龟仙茶;高脂血症;大鼠


  随着人们生活水平的不断提高,一系列的健康问题也接踵而来。而肥胖便是困扰人们健康重要问题之一。肥胖是指人体体重超出正常范围的一种疾病,同时也是导致“三高”及各种心脑血管病的重要因素之一[1]。高血脂则是一种血脂代谢紊乱性疾病,表现为血清总胆固醇(TC)或TG中的1项或2项增高以及LDL升高,而HDL降低[2]。高血脂病是当今社会常见病、多发病,是目前公认的心脑血管疾病的主要危险因素,同时也是导致脂肪肝的主要病因之一。虽然已有部分药物对此类疾病有着较好的治疗效果,但是由于其药物副作用较多,且复杂及服药等问题,给此类患者带来极大的不便[3]。因此,本实验旨在观察GXC水提物对大鼠血脂水平调节作用,为GXC的后续开发、及引用用提供有效的理论依据。


01材料与方法


1.1 实验材料


  选取SD雌性大鼠60只,体重(200±20) g,大鼠形体外观的各个方面符合健康标准。由广州实验动物中心提供,许可证号:SCJN-(粤) 2016-0812。


1.2 实验用试剂


  TCHO、TG、LDL、HDL:安耐吉试剂有限公司,ALT、AST、GSH-PX、MDA、SOD试剂盒:碧云天生物试剂有限公司。


1.3 对照组药液、GXC实验用液和高脂饲料的配制


  对照组药液:含10 %市售降脂药(洛伐他汀)溶液。高脂饲料的配制:8.8 %猪油,1.0 %胆固醇,10 %蛋黄粉,0.2 %胆盐和80 %的基础饲料配制而成[4]。龟仙茶提取液(GXC):龟仙茶提取液(GXC):龟仙茶(石金钱龟、人参、枸杞、红茶)水煮,浓缩成每1mL含1.50 g茶浸提物的浓缩液,4℃保存备用,使用时用蒸馏水配制成所需不同浓度。
 


1.4 动物实验


  将SD雄性大鼠60只,随机分为5组,每组12只,即Ⅰ(正常对照组)、Ⅱ(模型对照组)、Ⅲ(低剂量组-100 mg/kg)、Ⅳ(中剂量组-200 mg/kg)、Ⅵ(高剂量组-400 mg/kg),正常对照组饲喂基础饲料,其余各组大鼠饲喂高脂饲料,正常对照组、模型对照组大鼠用生理盐水灌胃,降脂组大鼠分别用(GXC)灌胃(按2 mL/100 g鼠重体积),1次/d,连续21 d,且每周称量鼠重1次[5]。于末次灌胃后将全部大鼠禁食过夜,次日用2 %的戊巴比妥钠溶液(按2 mL/kg体重)进行腹腔麻醉并解剖,腹主动脉取血,分离血清和血浆,参照试剂盒说明进行GSH-PX、MDA、SOD等含量测定[6]。


02结果与分析


2.1实验大鼠体重、肝重变化


  整个实验过程中各组大鼠未见异常情况,饮食、活动、粪便及摄食量等情况正常,但实验组大鼠体重增加较缓慢,且实验结束时实验组大鼠平均体重均低于正常对照组,对实验大鼠处死后其肝重进行分析见表1。






  分析表 1中我们得知,模型组的平均肝重与其它各组相比,其值均明显大于其它组,统计学分析具有显著性差异(P<0.05),降脂组大鼠肝重虽然大于正常组但均低于模型组,说明GXC具有一定的护肝作用。


2.2 GXC对血清转氨酶(ALT、AST)、血脂(TCHO、TG、LDL、HDL)含量的影响


表2 各组大鼠的血清转氮酶活力及血清中血脂含量








 分析表2数据,模型组大鼠血清中的ALT活力明显高于GXC低、中、高剂量组,并且差别较明显。说明GXC能降低血清中ALT的活力,而AST值各个实验组与模型对照组及差别较小。模型组大鼠血脂TCHO、TG和HDL含量明显升高,而LDL含量却明显降低,实验结束后,GXC各实验组其TCHO、TG和HDL均有明显的降低,而LDL含量虽有上升但变化不明显。




2.3 GXC对大鼠血清(SOD、MDA、GSH-PX)和血浆(GSH-PX)活力的影响


表3 各组大鼠的血清、血清中GSH-PX及血清中SOD及MDA含量







 分析表3 各组大鼠的血清、血清中GSH-PX及血清中SOD及MDA含量数据可知,模型组大鼠血清中SOD、MDA含量明显高于对照组,且有显著差异。从血清中SOD值的结果看GXC组能明显降低大鼠血清中SOD的含量。而MDA得含量随其剂量的增加显著降低。模型组大鼠血清,血浆中GSH-PX含量明显降低,在实验结束时其血浆、血清中GSH-PX含量均具有较明显的升高,且具有一定的剂量依赖性。






03结 论


  本实验中各组大鼠活动、饮食均未见异常,粪便性状也未见明显改变,可见实验过程中不是通过抑制食欲或致泻等消极因素而达到降低血脂的效果,从而从另一个侧面说明GXC具有一定的预防高血脂症的作用。


  与模型组大鼠血液中血清转氮酶活力相比,GXC低、中、高剂量组均降低了血清中ALT的活力,而且呈现一定的剂量依赖性。MDA的含量可反映机体内脂质过氧化程度并间接反映机体细胞受自由基攻击导致细胞损伤的程度[7]。实验结果显示模型组中MDA含量明显升高,GXC低、中、高剂量组均则均降低了MDA的含量,并具有一定的浓度依赖性。肝细胞是通过增加谷胱甘肽过氧化物酶的活性来清除自由基及防止过氧化作用而保护肝细胞[8-9]。模型组的谷脱甘肽过氧化物酶活力明显低于对照组和各实验组,而实验组随剂量的增大对血浆、血清中的GSH-PX的影响也随之变大。综合分析以上数据表明,GXC具有较好的预防高脂血症的功效,但GXC调节血脂水平的作用机制等目前还尚不清楚,有待于我们的进一步研究。




参考文献


  [1] 中国肥胖问题工作组数据汇总分析协作组. 我国成人体重指数和腰围对相关疾病危险因素异常的预测价值:适宜体重指数和腰围切点的研究. [J]. 中华流行病学杂志. 2002(01).


  [2] 闫志芳,王永辉,刘季英等. 建立高血脂症动物模型的实验研究. [J]. 山西中医学院学报. 2004 (04).


  [3] 冯任南,郭福川,李颖等. 急性高血脂小鼠模型蛋黄乳及Trition法建立. [J]. 中国公共卫生. 2010 (09).


  [4] 靳广,魏枫. 糖尿病肾病小鼠模型研究进展. [J]. 中国临床研究. 2010 (02).


  [5] 陈宗道. 茶叶化学工程学. [M]. 重庆:西南师范大学出版社,1999.


  [6] 李慧,周淑佩,范江霖等. 应用体细胞基因转移技术建立的遗传性极度高血脂小鼠模型.[J]. 中国实验动物学报. 2004 (02).


  [7] 高莹,李可基,唐世英等. 几种高脂血症动物模型的比较. [J]. 卫生研究. 2002 (02).


  [8] 张丽平,童华荣. 抗氧化能力测定方法的研究进展. [J]. 中国食品添加剂,2004,(3):108 -113.


  [9] 白桂芹,成军,张树林等. 谷肽甘肽过氧化物酶与肝炎病毒蛋白关系的研究进展. [J].胃肠病学和肝病学杂志,2004 13 (1):82 -84.